按每mg干粉加入20μl(可调)UKS液[9.5M尿素,5mM碳酸钾,1.25%SDS,0.5%DTT(二硫苏糖醇),2%Ampholine(AmershamPharmaciaBiotechInc,pH3.5-10),6%TritonX-100],37℃温育30min,期间搅动几次,28度(温度低,高浓度的尿素会让溶液结冰)16000r/min离心15min,离心力越大时间长一点越好!上清即可上样电泳。或者-70度保存
3、用离心机离心8000rpm40min4℃或11100rpm20min4℃
4、提取上清液,样品制备完成。
4、上样前加入裂解液,室温放置30分钟,使蛋白充分溶于裂解液中,然后离心(15℃8000rpm以上1小时或更长时间以没有沉淀为标准),可临时保存在4℃待用。
高速冷冻离心机自问世以来,历经低速、调整、**速的变迁,其进展主要体现在离心设备和离心技术两方面,二者相辅相成。从转速看,台式离心机基本属于低速、高速离心机的范畴,因此具有低速和高速离心机的技术特点,其结构主要由电机驱动系统、制冷系统、机械系统、转头和系统控制等几部分组成。通用台式离心机的发展已经模糊了低速、高速量离心机的界线,众多的转头为科研人员提供相当广泛的应用范围,成为科研实验室机型。
高速冷冻离心机如果出现问题应该怎么办?一般来说,常见的问题有哪些应该怎样处理?我们一起来听听实验室离心机*的建议:
因为没有相关的维修资料和专业的维修工具,电机的控制方面是否有问题不能确定。因此首先检查转子的电机方面,经用万用表测量可知电机的电路正常也就是说电机的线圈方面没有问题。再检查电机的碳刷,把碳刷从转子的底座下拆下后也没有发现碳刷有磨平等常见故障现象。因此基本可以确定转子的电机方面没有问题(硬件正常),因此故障的原因基本可以确定是电机的控制方面的问题,但是在缺少资料和工具的前提下又不能很快的发现和解决问题,致使我们的设备不能正常运转。