4、上样前加入裂解液,室温放置30分钟,使蛋白充分溶于裂解液中,然后离心(15℃8000rpm以上1小时或更长时间以没有沉淀为标准),可临时保存在4℃待用。
(2)电源具有独立地线,严禁零线与地线共用,防止电击伤人。
铝合金不能受腐蚀
离心机转子一般是用铝合金制造,当受腐蚀后强度降低,轻易失事故。铝合金易受液体腐蚀,清洗后应用吹风机吹干,或颠倒一段时间,确认干了才能使用。有的血站进口离心机,6个铝杯里应有的6个塑料托没有。塑料托中应放血袋,避免直接放在铝杯里。留意试管有无裂纹。若试管(尤其是反复使用的试管)有裂纹,万万不可使用,否则在使用中试管破裂会引起转子旋转中失往平衡,可引发断轴等恶性事故。
断轴事故
转子没安放好,或装样品不平衡**过量太大,离心机开动。现代的进口离心机虽都有不平衡保护,即当不平衡量**过某一**,应自动断电,令离心机停转。但在上述情况下,已经晚了,会出现恶性事故。恶性事故之一是断轴,由于高速旋转中忽然断轴,离心转子没有了支撑,在离心腔中乱转乱撞,可使离心机整机转270°角度。此时,若旁边有职员或设备,会造成职员伤亡与毁坏设备的事故。
用户在选型时必须按分离介质的理化性质(介质种类、温度、浓度、粘度、固相物的滑移、滤饼硬度、对固相颗粒的要求、允许的固相滤渣中的剩余液相等)、分离过程中和所处的生产环境中的防腐和防爆要求,确定低速离心机的型号和型式,以达到预期目的及安全要求。
这种方法针对SDS-PAGE,垂直板电泳!
二、植物组织蛋白质提取方法
氯醋酸—丙酮沉淀法