采用不同离心速度与时间,使不同沉降速度的颗粒分批分离;
差速离心法:
原理:采用逐渐增加离心速度或低速和高速交替进行离心,使沉降速度不同的颗粒在不同的分离速度及不同的离心时间下分批分离的方法,称为差速离心法。
当以一定离心力在一定的离心时间内进行离心时,在离心管底部就会得到和重颗粒的沉淀,分出的上清液在加上转速下再进行离心,又得到*二部分较大、较重颗粒的“沉淀”及含小和轻颗粒“上清液”,如此,多次离心处理,即能把液体中的不同颗粒较好分开。这时所得沉淀是不纯的,需经再悬浮和再离心(2—3次),才能得到较纯颗粒。
常用于从组织匀浆中分离细胞和病毒。
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目前,我国磁悬浮离心机技术逐渐完善,未来有望成为科学技术的创新点以及市场有力的增长点,因此,技术创新是当前磁悬浮离心机发展的当务之急。在节能减排政策的推动下,相信未来磁悬浮离心机会为国产仪器制造商带去良好的经济效益。
在离心机选型时必须考虑被分离物料的一些特殊性质和对分离所得的产品的一些特殊要求,例如:
(1)液相属易挥发性或易引起爆炸和易燃性物料时,不能用真空过滤,且要求密闭防爆。腐蚀性较强的物料,对分离机械材料的选择有特殊要求。
(2)固相颗粒硬度较大时,则要求所选分离机械材料的耐磨性好。固相物料为结晶产品时,要求分离时结晶的破损程度低。这对分离机械的结构及卸料方式、方法都有特殊要求。
(3)被分离物料,无论是固相或液相,若属于贵重物料,则要求回收率高。
液-固,液-液等非均相混合物的分离主要涉及固相颗粒物料及液相物料。 机械分离过程取决于物理过程离心机械分离性能的优劣,与被分离物料的物理性能也有较大关系。各种离心机的适应范围也依据物料的性质来划分,说白了也就是利用离心原理进行分离的重力沉降或固相颗粒的粒径分布、固相密度、颗粒形状以及液相的密度、粘度和表面张力等均密切相关。
密度梯度离心,又称为速率区带离心,是沉降系数较接近的物质分离的方法。
工作原理:不同颗粒之间存在沉降系数差时,在一定离心力作用下,颗粒各自以一定速度沉降,在密度梯度不同区域上形成区带的方法。
介质梯度应预先形成,介质的密度要小于所有样品颗粒的密度。
常用介质:蔗糖、甘油;
密度梯度液的制备用梯度混合器,形成由管口到管底逐步升高的密度梯度;
具体操作流程:离心前将样品小心铺放在密度梯度溶液表面,离心形成区带。离心后不同大小、不同形状、有一定沉降系数差异的颗粒在密度梯度液中形成若干条界面清楚的不连续区带;
应用范围:可用来分离核酸、蛋白质、核糖体亚基及其它成分。